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如何正確使用無血清細(xì)胞凍存液?

發(fā)布時間: 2024-12-11  點(diǎn)擊次數(shù): 140次
  無血清細(xì)胞凍存液是一種特殊的細(xì)胞保存液‌。
  
  1、‌成分明確‌:不含動物來源性蛋白和血清,有效減少細(xì)菌、病毒和支原體等污染風(fēng)險(xiǎn)‌。
  
  2、‌高安全性‌:由于不含有異源成分,因此具有更高的安全性,適用于體內(nèi)研究‌。
  
  ‌3、細(xì)胞存活率高‌:含有DMSO、葡萄糖等細(xì)胞營養(yǎng)成分,有助于提高細(xì)胞的存活率和活力‌。
  
  ‌4、適用性廣‌:通用于各種動物細(xì)胞株,包括腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞‌。
  

無血清細(xì)胞凍存液

 

  正確使用無血清細(xì)胞凍存液的步驟如下‌:
  
  1、‌細(xì)胞收集與離心‌:
  
  使用常規(guī)方法收集處于對數(shù)生長期的細(xì)胞。
  
  對于貼壁細(xì)胞,使用胰酶或EDTA消化,收集到試管中。
  
  將細(xì)胞懸浮液離心,通常條件為1000-2000rpm,4℃,持續(xù)3-5分鐘,保留細(xì)胞沉淀‌。
  
  2、‌加入凍存液與混合‌:
  
  向細(xì)胞沉淀中加入適量的無血清細(xì)胞凍存液。
  
  輕柔混合均勻,避免產(chǎn)生氣泡和剪切力,使細(xì)胞濃度達(dá)到適宜范圍‌。
  
  3、‌分裝與凍存‌:
  
  將混合均勻的細(xì)胞懸液分裝到冷凍保存管中。
  
  直接放入-80℃超低溫冰箱中進(jìn)行冷凍保存,或先-80℃過夜再轉(zhuǎn)移至液氮罐中‌。
  
  4、‌注意事項(xiàng)‌:
  
  操作過程需在超凈工作臺內(nèi)無菌進(jìn)行。
  
  加入細(xì)胞后應(yīng)盡快移至-80℃保存,減少室溫存放時間。
  
  控制好胰酶的消化時間,避免消化過度。
  
  重懸細(xì)胞時要輕柔且充分,避免細(xì)胞損傷和成團(tuán)‌。
  
  遵循上述步驟和注意事項(xiàng),可以確保無血清細(xì)胞凍存液的正確使用,提高細(xì)胞凍存效果。
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